酶標(biāo)儀濾光片的應(yīng)用與介紹

   酶標(biāo)儀（MicroplateReader）是對(duì)酶聯(lián)免疫檢測(cè)（EIA）實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)通過(guò)偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行的，反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示，通過(guò)顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測(cè)抗體或抗原的濃度。   隨著檢測(cè)方式的發(fā)展，擁有多種檢測(cè)模式的單體臺(tái)式酶標(biāo)儀叫做多功能酶標(biāo)儀，可檢測(cè)吸光度（Abs)、熒光強(qiáng)度(FI)、時(shí)間分辨熒光（TRF)、熒光偏振（FP)、和化學(xué)發(fā)光（Lum)。  

 酶標(biāo)儀從原理上可以分為光柵型酶標(biāo)儀和濾光片型酶標(biāo)儀。光柵型酶標(biāo)儀可以截取光源波長(zhǎng)范圍內(nèi)的任意波長(zhǎng)，而濾光片型酶標(biāo)儀則根據(jù)選配的生化儀干涉濾光片，只能截取特定波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)。   酶標(biāo)儀工作原理：   酶標(biāo)儀測(cè)定的原理是在特定波長(zhǎng)下，檢測(cè)被測(cè)物的吸光值。光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過(guò)濾光片之后變成一束單色光，進(jìn)入塑料微孔極中的待測(cè)標(biāo)本.該單色光一部分被標(biāo)本吸收，另一部分則透過(guò)標(biāo)本照射到光電檢測(cè)器上，光電檢測(cè)器將這一待測(cè)標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號(hào)轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號(hào).電信號(hào)經(jīng)前置放大，對(duì)數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號(hào)處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算，最后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。 

   酶標(biāo)儀濾光片的放置：   在使用濾光片作濾波裝置時(shí)與普通比色計(jì)一樣，酶標(biāo)儀濾光片即可放在微孔板的前面，也可放在微孔板的后面，聚光鏡，光欄后到達(dá)反射鏡，經(jīng)反射鏡作90°反射后垂直通過(guò)比色溶液,然后再經(jīng)濾光片送到光電管. 

   酶標(biāo)儀檢測(cè)什么？   光通過(guò)被檢測(cè)物，前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量，特定波長(zhǎng)下，同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。檢測(cè)單位用OD值表示， OD是optical density（光密度）的縮寫(xiě)，表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度   檢測(cè)結(jié)果的影響因素：   由于有相當(dāng)多的因素會(huì)影響檢測(cè)的結(jié)果，如不同的酶標(biāo)板，檢測(cè)試劑的體積，都會(huì)造成OD值的不同，因此，只有使用同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測(cè)結(jié)果才能比較和分析。  

 酶標(biāo)儀的用途：   可廣泛應(yīng)用于低紫外區(qū)的DNA、RNA定量及純度分析（A260/A280）和蛋白定量（A280/BCA/Braford/Lowry），酶活、酶動(dòng)力學(xué)檢測(cè)，酶聯(lián)免疫測(cè)定（ELISAs），細(xì)胞增殖與毒性分析，細(xì)胞凋亡檢測(cè)（MTT），報(bào)告基因檢測(cè)及G蛋白偶聯(lián)受體分析（GPCR）等